一、技术指标:
1.二代survey测序
构建350bp二代文库;采用MGI2000平台进行测序;测序深度不低于50X,即下机的总测序数据量不低于260G clean data;
2、PacBio平台测序
对检测合格的DNA样品构建20K大片段文库,使用PacBio测序仪进行测序,测序深度不低于100X,即下机的总测序数据量不低于500G,且Raw Quality大于0.80,数据平均长度为9-15kb,N50为12-20kb。
3、基因组组装
对下机的PacBio数据进行基于三代测序技术的组装,并使用MGI2000测序数据进行校正,组装的结果要求达到如下指标:基因组完整度达到85%以上,ContigN50不低于2Mb;
4、生物信息分析
(1)基因组survey分析:首先对原始数据进行去除接头、污染序列及低质量read的处理,然后对产出的数据进行初步分析并进行质控,随后进行基因组组装、GC-depth分布分析、GC含量分析、测序深度分析、常染色体区域覆盖度评估以及基因区覆盖度评估。
(2)denovo组装分析:包括测序数据质控,contig组装,Scaffold组装,gap填充,组装质量评估。
(3)基因组注释:包括重复序列注释,基因结构注释,基因功能注释,非编码RNA注释。
(4)基因组标准分析:包括基因家族聚类,物种进化树构建,系统进化分析,物种分歧时间估算,基因家族扩张和收缩,正选择分析,全基因组复制分析,基因共线性分析。
5、完成20个植物的转录组测序:
完成20个植物转录组的样本提取,获得高质量的RNA。对获取的RNA进行转录组建库,库检合格后,利用MGI-2000平台,对文库上机测序,每个样本测序数据量不低于5G。对下机数据进行过滤和质控,并进行以下分析:
(1)参考基因组比对
(2)新转录本预测
(3)SNP和INDEL检测
(4)差异剪接基因检测
(5)基因表达量计算(基因比对率及表达数目统计、Reads对转录本的覆盖度及分布、样品间的相
(6)关性、PCA分析、样品中基因表达量的分布、样品间及组间的基因表达情况)
(7)基因表达量聚类分析
(8)时间序列分析
(9)差异表达基因检测
(10)差异表达基因维恩图分析
(11)差异表达基因层次聚类分析
(12)差异表达基因GO功能分析
(13)差异表达基因Pathway功能分析
(14)差异表达基因TF编码能力预测
(15)差异表达基因蛋白互作分析
(16)差异表达基因中的植物抗病基因预测
二、售后服务:
1、投诉和建议响应时间要求:
24h内响应投诉或建议,72h内反馈改进方案
2、数据保存及传输要求:
数据保存24个月,中标人需提供移动硬盘用于数据传输。在项目完成后3年之内,如果项目结果存在疑义或者不完善的(例如数据分析存在差错、数据量不够),项目委托方对中标公司保留追究责任的权利,并与中标人协商解决。 |